【摘 要】
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目的 克隆扩增APC11开放阅读框基因片段,构建其真核表达重组质粒,为后续研究其功能做准备.方法 按照GenBank中人APC11序列设计引物,以HeLa细胞cDNA为模板,扩增出基因片段.该
【机 构】
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南方医科大学基因工程研究所,华南基因组研究中心
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目的 克隆扩增APC11开放阅读框基因片段,构建其真核表达重组质粒,为后续研究其功能做准备.方法 按照GenBank中人APC11序列设计引物,以HeLa细胞cDNA为模板,扩增出基因片段.该片段与真核表达载体pEGFP-C1连接,得到的重组质粒经双酶切和测序鉴定后用Western印迹检验表达.结果 扩增片段长度为285 bp,重组真核表达质粒经双酶切鉴定后测序鉴定正确.Western印迹证实pEGFP-C1-APC11在真核细胞内表达.结论 成功克隆了APC11基因并构建了pEGFP-C1-APC11真核表达重组质粒,Western印迹证实其表达良好,对该基因功能的深入研究打下了坚实基础.
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