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目的：探讨以间充质干细胞作为饲养层细胞分离培养昆明小鼠胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ES细胞）的方法。方法：以鼠间充质干细胞作为饲养层，收集受孕3．5～4d昆明小鼠的囊胚和桑椹胚进行培养，筛选纯化细胞集落，使其稳定传代后，采用光镜，碱性磷酸酶染色及Oct—d染色对其形态学和生物学性状进行初步鉴定。结果：以间充质干细胞作为饲养层细胞分离培养的昆明小鼠ES有其典型的形态学特征：集落呈鸟巢状，边缘清楚，表面平滑，结构致密，隆起生长，细胞之间界限不清楚；单个细胞体积小、核大；对ES细胞碱性磷