白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段的克隆及其作为基因表达内参照的应用

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:anysome_921
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目的 获取白纹伊蚊β-肌动蛋白基因序列并探讨其作为基因表达内参照的作用.方法 根据昆虫β-肌动蛋白核苷酸序列的高度保守区设计引物,通过PCR的方法从白纹伊蚊C6/36细胞中扩增获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,进一步通过RT-PCR的方法验证其在稳定转染空载体和40S核糖体蛋白S4(RPS4)基因的白纹伊蚊C6/36细胞中的表达.结果 获得白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,长911 bp,与其他几种蚊β-肌动蛋白基因对应序列的相似性在89%以上.在稳定转染空载体和RPS4基因的C6/36细胞中,均可稳定地扩增出目的基因.结论 成功获得了白纹伊蚊β-肌动蛋白基因片段,并且该片段完全可以用作基因表达差异分析时的内参照基因.
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