【摘 要】
:
目的探讨小干扰RNA(siRNA)重组慢病毒介导的类表皮生长因子域7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)基因沉默对体外培养喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭潜能的影响.方法采用RNA干扰技术,构建靶向EGFL7的shRNA重组慢病毒并转染Hep-2细胞,通过Real-timePCR和Western blot在mRNA及蛋白水平鉴定转染结果;实验分为空
【机 构】
:
中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广州510630,中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广州510630,中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科,广州510630,中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈
论文部分内容阅读
目的探讨小干扰RNA(siRNA)重组慢病毒介导的类表皮生长因子域7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)基因沉默对体外培养喉癌Hep-2细胞增殖和侵袭潜能的影响.
方法采用RNA干扰技术,构建靶向EGFL7的shRNA重组慢病毒并转染Hep-2细胞,通过Real-timePCR和Western blot在mRNA及蛋白水平鉴定转染结果;实验分为空白对照组(NC)、空白慢病毒感染组(Lenti-NC)和EGFL7基因沉默慢病毒感染组(Lenti-EGFL7),采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Transwell侵袭实验观察细胞侵袭能力.
结果Real-time PCR检测说明Lenti-EGFL7组mRNA相对表达量较NC组下降达94%(P<0.001),Western blot检测证实Lenti-EGFL7组EGFL7蛋白相对表达量为(0.07 ±0.04)较NC组的(0.39 ±0.12)明显减低(P <0.001),表明成功构建稳定沉默EGFL7基因的喉癌Hep-2细胞株.CCK-8细胞增殖实验说明靶向沉默EGFL7表达导致喉癌细胞增殖明显抑制(P<0.01),流式细胞术检测证实,与NC组和Lenti-NC组相比,Lenti-EGFL7组S期细胞百分比明显升高(P<0.01),G1期细胞百分比下降(P<0.05),细胞凋亡检测证实Lenti-EGFL7组细胞凋亡率为(66.2±1.28)%较NC组的(6.09±3.28)%和Lenti-NC组的(9.86±2.13)%明显增加(P <0.001).Transwell侵袭实验发现Lenti-EGFL7组穿过Matrigel到达下室的平均细胞数较NC组和Lenti-NC组均明显减少(P<0.01).
结论靶向沉默EGFL7基因能抑制体外培养喉癌Hep-2细胞的增殖并降低细胞侵袭能力.
其他文献
近年来,喉癌的治疗策略发生很大改变,早期喉癌可通过手术或放疗治疗,而晚期病变则需要综合考虑患者全身状况,常综合运用手术、放疗、化疗、免疫治疗等手段,尽可能保留喉功能,在提高生存率的同时不断提高患者的生活质量.
由中华医学会中华耳鼻咽喉头颈外科杂志编辑委员会和中华医学会中华耳鼻咽喉头颈外科学分会鼻科学组主办,安徽省立医院及安徽医科大学第一附属医院协办的国家级继续教育项目“2014年全国鼻科年会暨第六届全国鼻部感染与变态反应疾病专题学术会议”拟于2014年9月11日(周四)-14日(周日)在安徽省合肥市举行。
目的分析探讨一个连续七代表现为常染色体显性遗传性非综合征型迟发性耳聋家系的临床表型及遗传学特征.方法2011年8月对浙江省-耳聋家系成员进行病史采集、全身及听力学检查,绘制遗传图谱并进行遗传学特征分析.通过常规PCR扩增及Sanger测序方法筛查GJB2、MTRNRl(12SrRNA)、SLC26A4基因致病突变.使用定向捕获联合二代测序技术,对包括所有已知非综合征型耳聋的79个耳聋相关基因的外显
Churg-Strauss综合征(Churg-Strauss syndrome,CSS)是少见的、原因不明的多发性血管炎,主要侵及中、小血管,其特点是常有成年开始的支气管哮喘、嗜酸粒细胞增多和血管外嗜酸粒细胞肉芽肿.部分患者可查到抗中性粒细胞胞质抗体(antineutrophil cytoplasmic antibodies,ANCA),因此考虑与免疫反应有关,少数患者合并Wegener肉芽肿、C
目的评价白三烯受体拮抗剂(leukotriene receptor antagonists,LTRA)单一用药以及与第二代口服抗组胺药联合应用对变应性鼻炎(AR)的治疗结局,为临床优化治疗策略提供参考.方法搜索PubMed、EMBASE、中国生物医学文献数据库(CBMdisc)和中国期刊全文数据库(CJFD),检索AR药物治疗的随机对照试验(RCT)文献.依据文献纳入和排除标准,进行文献筛选,采用
由中华医学会显微外科学分会、中华医学会手外科学分会及中国康复医学会修复重建外科专业委员会联合主办,浙江省医学会、宁波市医学会、宁波市第六医院及温州医科大学共同承办的“世界显微外科穿支皮瓣峰会暨第十六届国际穿支皮瓣学习班”将于2014年11月6日至11日在宁波举行。本次峰会将汇集国内外显微外科、手外科、修复和重建外科领域的权威专家,对穿支皮瓣的最新动态、未来发展方向和近期研究成果进行交流。紧接其后,
北京大学第一医院耳鼻咽喉头颈外科与《中国医学文摘耳鼻咽喉科学》杂志社共同举办的国家级继续医学教育项目头颈肿瘤诊治新进展和鼻内镜外科技术学习班将于2014年8月30日至9月1日在北京金台饭店举行。学习班由中华医学会耳鼻咽喉头颈外科学分会常委、咽喉学组组长肖水芳教授主持,并邀请多名国内知名专家通过专题讲座、圆桌讨论、手术演示或录像等形式授课,介绍头颈肿瘤外科手术及修复技巧、c0:激光、等离子射频、超声
目的探讨窄带成像(narrow band imaging,NBI)内镜在喉部恶性病变活检过程中的作用.方法选取自2013年2月至2014年1月在天津市人民医院耳鼻咽喉头颈外科行电子鼻咽喉镜筛查,怀疑喉部恶性病变并取活检的患者113例,按照单、双日的随机方法将患者分为两组,白光组58例,在白光模式下行喉部肿物活检并送病理检查;NBI组55例,在NBI模式下行喉部肿物活检并送病理检查,两组患者均根据活
目的探讨婴幼儿颈面部淋巴管畸形的治疗方法.方法分析2009年1月至2013年12月共收治确诊的46例婴幼儿淋巴管畸形的临床资料,男26例,女20例;年龄9个月~4岁,中位数1.8岁,治疗前行影像学检查,了解肿块位置、大小和毗邻.结果46例中28例大囊型患儿采用Ⅰ期手术,完整切除7例,绝大部分切除21例;10例微囊型和8例巨大瘤体(最大径≥10 cm),包绕颈动静脉,采用低浓度平阳霉素注射,12例明
目的探讨人工耳蜗植入术的学习曲线及其对临床手术的指导意义.方法回顾分析2009年5月至2013年2月我科两位耳科医师开展人工耳蜗植入术早期病例的临床资料,其中甲医师98例,乙医师54例.分别统计两位手术医师人工耳蜗植入术的并发症发生率及手术耗时情况,以手术耗时为指标分别绘制甲、乙两组手术病例的散点图,采用振荡正弦曲线模型Y=sin(X)-P/2及对数曲线模型Y =b1ln(X)+bo进行曲线拟合并