人乳头瘤病毒16型E6蛋白真核表达载体pGADT7-E6的构建与鉴定

来源 :南华大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：s4553711

【摘要】

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目的构建HPV16E6基因的真核表达载体，为在酵母菌中表达以及进一步探讨HPV16E6基因与宫颈癌发生的关系奠定前期实验基础。方法用PCR扩增含EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的E6基因序列

【作者】

：

周艺王鑫朱翠明蒋永林粟盛梅尹卫国万艳平

【机构】

：

南华大学病原生物学研究所,南华大学公共卫生学院

【出处】

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南华大学学报：医学版

【发表日期】

：

2007年1期

【关键词】

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人乳头瘤病毒 E6基因 E6蛋白 HPV E6 gene E6 protein

【基金项目】

：

湖南省卫生厅资助课题（编号：B2005084）.

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目的构建HPV16E6基因的真核表达载体，为在酵母菌中表达以及进一步探讨HPV16E6基因与宫颈癌发生的关系奠定前期实验基础。方法用PCR扩增含EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的E6基因序列，双酶切pGADT7载体与E6基因PCR产物，纯化回收后，用连接酶将二者连接并转化大肠杆菌JM109，筛选阳性克隆，并对其进行双酶切和测序鉴定，构建HPV16E6基因的真核表达载体pGADT7-E6。结果双酶切pGADT7-E6后，琼脂糖凝胶电泳显示2个片段，分别在约500bp与8．0kb处。DNA测序结果经与GenB

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