T7噬菌体衣壳蛋白10A的表达、纯化及多克隆抗体的制备

来源 :解放军预防医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zwfyazl
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目的表达纯化T7噬菌体衣壳蛋白10A,并免疫家兔得到抗10.4多克隆抗体.为研究噬菌体展示抗体技术,进而筛选致病微生物蛋白抗体奠定基础。方法37℃培养含有17噬菌体10A蛋白质粒的大肠杆菌BLT5615,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷直接诱导表达该蛋白;SDS.PAGE鉴定表达状态,盐酸胍变性一尿素复性纯化以包涵体形式存在的蛋白并免疫家兔:辛酸一硫酸铵沉淀法纯化多克隆抗体,间接ELISA测定效价,WesternBlot鉴定特异性。结果成功表达了T7噬菌体衣壳蛋白10A。SDS—PAGE显示所表达的蛋白相对
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