长期体外培养大鼠胰岛的动态研究

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目的观察长期体外培养大鼠胰岛在分泌功能、基因表达及免疫荧光组织化学染色法的动态变化。方法采用胶原酶灌注消化和Dextran密度梯度离心分离、纯化获得大鼠胰岛;连续培养20d,定期检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS);实时聚合酶链反应(RT—PCR)和免疫荧光组织化学染色法检测胰高糖素(Glu)、胰岛素、胰腺十二指肠同源盒基因(PDX)-1、葡萄糖转运蛋白(Glut)-2基因mRNA及蛋白水平的表达。结果连续培养胰岛的GSIS水平持续下降;但RT—PCR及免疫荧光显示随培养时间延长,胰岛内关键基因表达并未
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