【摘 要】
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目的应用Gateway技术构建靶向人Akt基因的shRNA真核表达载体,转染肝癌细胞株HepG2,验证该载体能否下调Akt基因的mRNA水平。方法以Akt基因为靶点设计两条具有短发卡结构的shRN
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目的应用Gateway技术构建靶向人Akt基因的shRNA真核表达载体,转染肝癌细胞株HepG2,验证该载体能否下调Akt基因的mRNA水平。方法以Akt基因为靶点设计两条具有短发卡结构的shRNA序列,经退火成互补双链后克隆入pENTR/U6入门表达载体（pENTR/U6-Akt1,pENTR/U6-Akt2）;转化E.coliTOP10菌株,挑取阳性菌落进行菌落PCR和测序鉴定;利用Gateway技术进行LR位点特异性重组,将shRNA导入目的表达载体pLenti6/Block-it DEST Vec
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欧阳翠生于1917年，比安娥小12岁，原名崔素华，1940年从上海东吴法学院毕业。1933年在《良友》上发表处女作《奶妈》后，开始在《时代日报》的《新生》副刊发表散文、小说及评论，出版了小说集《春情曲》、散文集《无花的蔷薇》。她从1946年起任《文艺春秋》编辑，并主编《少年世界》。全国解放后也一直做编辑工作，曾在《文艺月报》、《上海文学》和《收获》任职。同时也为各报刊杂志写过很多文章。 一个冬日