【摘 要】
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目的 为探讨牛裂体吸虫(Schistosoma bovis)在裂体属内的系统发生位置,测定牛裂体吸虫线粒体基因部分序列,并分析该编码区域的基因序列和基因排序.方法 以GNT-K法抽提牛裂体
【机 构】
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日本高知大学医学部,高知,783-8505;佳木斯大学基础医学院,佳木斯,154007;日本长崎大学热带医学研究所,长崎,852-8523;澳大利亚詹姆斯库克大学热带生物学院,汤斯维尔,QLD,481
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目的 为探讨牛裂体吸虫(Schistosoma bovis)在裂体属内的系统发生位置,测定牛裂体吸虫线粒体基因部分序列,并分析该编码区域的基因序列和基因排序.方法 以GNT-K法抽提牛裂体吸虫成虫基因组DNA,用兼并和特异引物扩增目的基因.扩增产物经纯化后克隆于pGEM1 T质粒载体,并转化大肠埃希菌.抽提和纯化阳性质粒DNA,并测序.以纯化后的阳性质粒DNA为模板,根据已获得的序列设计内部特异引物,采用引物步移法获得全长目的片段.在GenBank中查找曼氏血吸虫等相关血吸虫线粒体基因序列,作基因排序及比较分析后,以邻接法绘制系统发生树.结果 测定了牛裂体吸虫线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基Ⅳ～Ⅰ基因序列(nicotinamide adenine dinucleotide dehydrogenase subunit 4-1gene, nad4-nad1),其长度为2 214 bp.分析该编码区基因排序为nad4-trnQ (Gln)-trnK(Lys)-nad3-trnD(Asp)-nad1.牛裂体吸虫在该区域的线粒体基因排序与非洲支系血吸虫相似,与亚洲支系血吸虫有很大的不同;根据牛裂体吸虫与其他8种吸虫部分nad4,nad3,部分nad1和部分nad4+nad3+nad1基因序列比对结果,分别构建系统发生树.结果 表明,牛裂体吸虫与埃及血吸虫位于同一簇,归属于非洲血吸虫支系,这与由基因排序推测的牛裂体吸虫的系统发生位置结果相一致.结论 牛裂体吸虫属于非洲支系而非亚洲支系血吸虫.
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