牛病毒性腹泻病毒石河子株E2基因的克隆及其表达载体的构建

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应用RT-PCR方法从牛病毒性腹泻病毒(BVDV)新疆石河子分离株中扩增了E2基因,命名Shihezi 148 (GenBank登录号:EU159699),扩增序列分析结果表明:Shihezi 148 E2基因长度为1 121 bp,编码373个氨基酸残基;同源性分析表明, Shihezi 148与澳大利亚Bega株E2基因核苷酸同源性为88.32%,与中国changchun 184株的同源性为74.42%;通过基因重组技术构建了去除C端跨膜区的截短E2基因的原核表达载体pProEX HTa-E2和包括信号肽和全长E2蛋白的真核重组质粒pVAX1-E2.经过PCR、酶切及测序结果表明pProEX HTa-E2和pVAX1-E2重组表达载体构建成功.
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