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目的
观察哇巴因(ouabain)对sD大鼠耳蜗螺旋神经节细胞(spiralganglioncell,SGC)的损伤。
方法75只雄性sD大鼠随机数字表法分为5组,除健康对照组外,其余4组经耳蜗鼓阶钻孔分别给予0.01、0.02、0.05mmol/L哇巴因以及生理盐水。术后7d行畸变产物耳声发射(DPOAE)及听陡脑干反应(ABR)测试;大鼠处死后取耳蜗组织,通过免疫组化和透射电镜观察耳蜗SGC形态学变化。体外分离培养孕14d胎鼠SGC,加入1×10^-8 mmol/L哇巴因,通过光镜和扫描电镜观察哇巴因对离体培养SGC的损伤。
结果鼓阶注入哇巴因后,大鼠DPOAE无明显改变,各组之间不同频率DPOAE幅值差异均无统计学意义(P值均>0.05)。耳蜗鼓阶注入哇巴因后,大鼠ABR反应阈升高,且升高幅度随着哇巴因浓度的增加而加大;哇巴因组大鼠ABR阈值与生理盐水组及健康对照组相比,差异具有统计学意义(P值均<0.05)。电镜下哇巴因组大鼠SGC发生退行性改变,细胞器结构破坏,核膜溶解,神经髓鞘崩解、空泡化。哇巴因同样可导致离体培养SGC的损伤,胞体皱缩、变小,突起缩短、断裂,细胞结构破坏。
结论无论是在体还是体外细胞培养,哇巴因均可确切造成SGC损伤。