原钙黏蛋白7b与绿色荧光蛋白融合基因表达载体的构建及其在MCF10A细胞中的表达定位

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：changkaiaini

【摘要】

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目的：构建原钙黏蛋白7b（PCDH7b）与绿色荧光蛋白（GFP）的融合基因表达载体pQCXIP-PCDH7b-EGFP,并检测PCDH7b-GFP融合蛋白在细胞中的表达定位.方法：以MDA-MB-436细胞基因组DNA为模板,P

【作者】

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陈昂袁龙张峥嵘梁剑青闫敏李世崇王启伟孙强刘真

【机构】

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军事医学科学院生物工程研究所,山西医科大学第二临床医院肿瘤内科,郑州大学附属肿瘤医院乳腺外科,华南理工大学生物工程系

【出处】

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生物技术通讯

【发表日期】

：

2016年3期

【关键词】

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原钙黏蛋白7 基因克隆亚细胞定位 proto-cadherin 7b gene cloning subcellular localization

【基金项目】

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国家自然科学基金（30871364）,国家重点基础研究发展计划（2015CB553704）,全军医学科技青年培育项目（14QNP119）

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目的：构建原钙黏蛋白7b（PCDH7b）与绿色荧光蛋白（GFP）的融合基因表达载体pQCXIP-PCDH7b-EGFP,并检测PCDH7b-GFP融合蛋白在细胞中的表达定位.方法：以MDA-MB-436细胞基因组DNA为模板,PCR扩增人PCDH7b基因,克隆入逆转录病毒载体pQCXIP-EGFP-N1构建pQCXIP-PCDH7b-EGFP,病毒包装后感染人乳腺上皮细胞系MCF10A,免疫荧光染色检测其与膜蛋白E钙黏蛋白的相对表达定位.结果：构建获得逆转录病毒载体pQCXIP-PCDH7b-EGFP,融

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