检测并分析砷暴露大鼠外周血调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)、辅助性T细胞-17(T helper 17,Th17)相关免疫因子的表达差异及意义。
方法选取健康初断乳Wistar大鼠32只,按大鼠体重,由小到大依次进行编号,采用随机数字表法分为对照组、低砷剂量组(1.25 ml/kg)、中砷剂量组(2.50 ml/kg)、高砷剂量组(5.00 ml/kg)4组,每组8只;对照组给予去离子水,其余各砷剂量组按体重用2.00 g/L的亚砷酸钠(NaAsO2)水溶液进行灌胃,每周6 d,连续染砷4个月。实验终期采集各组大鼠尿液和外周血,采用电感耦合等离子体质谱仪(inductively coupled plasma-mass spectrometry,ICP-MS)检测尿砷含量,结果以[中位数(最小值~最大值)]表示,尿砷经尿肌酐(urinary creatinine,uCr)校正,单位为μg/g Cr;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中Treg细胞相关因子白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1),Th17细胞相关因子IL-17、IL-6及T淋巴细胞活化相关因子IL-2的表达水平,结果以
±s表示。
对照组,低、中、高砷剂量组尿砷含量[7.50(3.16 ~ 9.81)、72.34(62.34 ~ 106.63)、209.15(154.41 ~ 232.20)、369.73(289.50 ~ 516.55)μg/g Cr]比较,差异有统计学意义(F= 337.55,P < 0.05)。对照组,低、中、高砷剂量组IL-10[(85.03 ± 7.11)、(93.96 ± 8.14)、(97.48 ± 6.23)、(93.47 ± 4.41)ng/L]、TGF-β1[(72.88 ± 2.96)、(81.45 ± 8.15)、(86.08 ± 7.55)、(90.29 ± 5.35)ng/L]、IL-17[(18.15 ± 3.66)、(25.54 ± 5.59)、(31.48 ± 5.74)、(37.25 ± 7.36)ng/L]、IL-6[(83.68 ± 8.48)、(85.14 ± 7.11)、(89.78 ± 5.36)、(93.48 ± 5.77)ng/L]、IL-2[(80.65 ± 6.90)、(73.86 ± 8.00)、(69.93 ± 7.77)、(62.06 ± 9.82)ng/L]表达水平比较,差异均有统计学意义(F= 5.094、11.054、16.249、3.474、5.119,P均< 0.05)。尿砷含量与TGF-β1、IL-17水平均呈正相关(r= 0.723、0.605,P均< 0.01),与IL-2水平呈负相关(r=-0.484,P < 0.05)。
结论砷暴露可引起大鼠Treg、Th17相关免疫因子分泌异常,导致机体抑炎与促炎平衡紊乱、免疫耐受能力减弱,进而参与砷致免疫损伤的发生发展。