【摘 要】
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目的构建人mIDH1基因的真核表达载体及U87稳转细胞系,观察mIDH1对胶质瘤U87细胞体内外增殖的影响。方法以IDH1-cDNA为模板,采用PCR方法扩增IDH1片段,IDH1片段经双酶切、连接
【机 构】
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宝鸡市中医医院脑病二科,西安交通大学第二附属医院神经外科
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目的构建人mIDH1基因的真核表达载体及U87稳转细胞系,观察mIDH1对胶质瘤U87细胞体内外增殖的影响。方法以IDH1-cDNA为模板,采用PCR方法扩增IDH1片段,IDH1片段经双酶切、连接重组至真核表达载体p-EGFP-C1,构建IDH1野生型(w IDH1)重组质粒,利用点突变技术通过IDH1真核表达载体构建突变型IDH1(mIDH1)真核表达载体,并通过双酶切产物明胶电泳及DNA测序鉴定该重组质粒。Lip2000脂质体介导突变型IDH1转染U87胶质瘤细胞,利用G418筛选构建稳定转染p-E
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