【摘 要】
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为了研制新型、有效的猪流行性腹泻病毒（PEDV）疫苗,本研究以乙肝核心抗原蛋白（HBcAg）作为多表位免疫原的载体蛋白,将PEDV S蛋白中的3个B细胞表位基因与S1截短序列基因串联后,插入到编码HBcAg的免疫显性区的基因中,构建重组质粒HBcAg-PE,并转化至大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达。重组蛋白HBPE经过纯化和Western-blot鉴定后,以不同剂量的重组蛋白通过肌肉注射途径免
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31602095）； 国家生猪产业体系项目（CARS-36-068）； “十三五”国家重点研发计划项目（2YFD0160501505）； 中国农业科学院兰州兽医研究所统筹项目（Y2016CG23）；
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为了研制新型、有效的猪流行性腹泻病毒（PEDV）疫苗,本研究以乙肝核心抗原蛋白（HBcAg）作为多表位免疫原的载体蛋白,将PEDV S蛋白中的3个B细胞表位基因与S1截短序列基因串联后,插入到编码HBcAg的免疫显性区的基因中,构建重组质粒HBcAg-PE,并转化至大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达。重组蛋白HBPE经过纯化和Western-blot鉴定后,以不同剂量的重组蛋白通过肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,对其免疫效果进行了初步评价。结果显示,重组蛋白HBPE在BL21（DE3）中以沉淀形式表达,纯化、复性后的重组蛋白HBPE能够与PEDV阳性血清发生特异性反应。重组蛋白HBPE能够刺激小鼠产生抗PEDV特异性抗体,同时可以产生相关的Th1型和Th2型细胞因子。上述结果表明,本研究成功构建了PEDV重组B细胞复合表位抗原HBPE,并在小鼠模型中初步评价了其免疫原性,为今后新型PEDV基因工程疫苗的研制提供了新的思路。
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