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目的 探讨骨肉瘤基因治疗的可行性。方法 采用逆转录病毒介导的HSV-TK基因转移和GCV治疗的方法进行研究。结果 成功构建含HyTK基因的重组逆转录病毒载体DORHyTK；采用DOTAP将其转入PA317细胞中进行包装，筛选，并进行病毒滴度测定、收获病毒上清体外感染骨肉瘤细胞株OS732和SAOS-2。分别用PCR和RNA斑点杂交的方法证明假病毒中不含有复制活性病毒，HSV-TK基因已整合到宿主细胞基因组中，并获得表达。MTT比色法测定结果显示GCV对OS732TK和SAOS-2TK细胞均有明显的杀伤作用