【摘 要】
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为在真核细胞中共表达猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白与猪O型口蹄疫病毒(FMDV) VP1蛋白,本研究将其各自编码基因克隆于杆状病毒双表达载体(pFastBacTM Dual)中构建重组转移质粒
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001
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为在真核细胞中共表达猪圆环病毒2型(PCV2) Cap蛋白与猪O型口蹄疫病毒(FMDV) VP1蛋白,本研究将其各自编码基因克隆于杆状病毒双表达载体(pFastBacTM Dual)中构建重组转移质粒(pFBD-Cap-VP1),转化至DH10BacTM感受态细胞中制备重组杆粒(rBacmid-Cap-VP1),并转染Sf21昆虫细胞,拯救出能够共表达PCV2-Cap和FMDV-VP1蛋白的重组杆状病毒(rBac-Cap-VP1).SDS-PAGE和western blot检测结果表明,共表达的重组PCV2-Cap和FMDV-VP1蛋白产物的分子量分别为28 ku和30 ku,各占总蛋白含量的11.6％和3.4％,能够分别与PCV2和FMDV抗体发生特异性反应,表明共表达蛋白具有良好的反应原性.本研究为PCV2和FMDV基因工程二联亚单位疫苗的研制奠定了基础.
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