High Level Expression of Glucose-6-phosphate Dehydrogenase Gene PsG6PDH from Populus suaveolens in E

来源 :Forestry Studies in China | 被引量 : 0次 | 上传用户:hernquist
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In order to investigate the functions of the gene PsG6PDH and the mechanisms underlying freezing tolerance of Populus suaveolens, the recombinant expression vector pET-G (pET30a-G6PDH), which contained full encoding region of PsG6PDH gene, was established. The recombinant was identified by lawn-PCR and double enzyme digestion and then transformed into expression host XA90 and induced by isopropyl-a-D-thiogalactoside (IPTG) to express 100 kD polypeptide of G6PDH fusion protein. The results showed that the expressed amount of the fusion protein culminated after 1 mmol·L–1 IPTG treatment for 4 h and that pET-G product was predominately soluble and not extra-cellular secreting. In order to investigate the functions of the gene PsG6PDH and the mechanisms underlying freezing tolerance of Populus suaveolens, the recombinant expression vector pET-G (pET30a-G6PDH), which contained full encoding region of PsG6PDH gene, was established. The recombinant was identified by lawn-PCR and double enzyme digestion and then transformed into expression host XA90 and induced by isopropyl-aD-thiogalactoside (IPTG) to express 100 kD polypeptide of G6PDH fusion protein. The results showed that expressed amount of the fusion protein culminated after 1 mmol L-1 IPTG treatment for 4 h and that pET-G product was predominately soluble and not extra-cellular secreting.
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