【摘 要】
：
目的 构建人DOC-1R基因重组逆转录病毒表达载体,实现该基因在体外培养细胞中的大量表达,从而研究表达蛋白的功能.方法 通过重组技术将含有FLAG标签序列的DOC-1RcDNA编码区全
【机 构】
：
中国医科大学医学基因组学教研室卫生部细胞生物学重点实验室暨教育部医学细胞生物学重点实验室,辽宁沈阳,110001
论文部分内容阅读
目的 构建人DOC-1R基因重组逆转录病毒表达载体,实现该基因在体外培养细胞中的大量表达,从而研究表达蛋白的功能.方法 通过重组技术将含有FLAG标签序列的DOC-1RcDNA编码区全长克隆至逆转录病毒载体pLXSN,菌落PCR鉴定、限制性内切酶双酶切及测序验证重组载体的构建.将重组载体转染至GP-293细胞进行病毒包装并以所包装的病毒感染HeLa细胞,通过Western blot及间接免疫荧光染色检测重组DOC-1R蛋白的表达及细胞内定位.结果 测序结果表明重组载体中插入的重组片段序列及开放阅读框架正确,逆转录病毒表达载体pLXSN-FLAG-DOC-1R成功构建.Western blot及间接免疫荧光染色结果证实,逆转录病毒介导的重组DOC-1R蛋白在HeLa细胞中高效表达,表达效率明显高于真核表达载体介导的重组蛋白表达.结论 DOC-1R基因逆转录病毒表达载体成功构建,重组蛋白在体外培养细胞正确高效表达.
其他文献
目的 观察神经生长导向因子Slit2在鸡胚神经管和脊髓不同发育时期的表达变化.方法 用免疫组织化学方法检测Slit2蛋白在鸡胚原肠期(HH6-HH10)神经管和第3d-17d(E3-E17期)脊髓
造就一支结构合理、素质优良的社会工作队伍是构建社会主义和谐社会的迫切需要.应推进社会工作队伍的制度化,切实做好社会工作人才培养工作.抓紧培养大批社会工作急需的各类
文章首先对OCR技术的发展背景进行了介绍,指出了OCR文字识别系统在扫描仪、文字编辑等领域的应用及优势.通过对OCR技术工作原理的介绍,重点论述了OCR文字识别系统主要的图像
目的 编制1份初中生学习主观幸福感量表,用于测量中国初中生的学习主观幸福.方法 采用编制的初中生学习主观幸福感量表对529名初中生进行了调查,探讨了初中生学习主观幸福感
为探究吕家坨井田地质构造格局,根据钻孔勘探资料,采用分形理论和趋势面分析方法,研究了井田7
随着我国经济社会的发展与人口增长,资源不足的矛盾日益突出。水域污染严重,捕捞能力过度以及各类工程建设等诸多因素,导致我国水域生态环境不断恶化,水生生物资源处于严重衰
在工程管理中运用电脑科技,对工程管理有非常大的作用,能在一定程度上提升工程管理水平.要使电脑科技在工程管理上更广泛的运用,还需要知道工程管理中需要解决的困难与漏洞,
中药饮片的质量好坏与否直接关系到惠者治疗效果的高低,如何提高中药饮片储存的有效性和质量管理的水平对确保为患者提供高质量的中药饮片具有重要意义.本文就我院近年来关于