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目的
探讨神经营养因子受体(NRAGE)亚细胞定位改变与人食管癌细胞上皮和间质转化及放射抗性形成的关系。
方法应用转化生长因子(TGF-β1)诱导人食管癌细胞TE13，建立上皮间质转化(EMT)模型细胞。以TE13细胞、EMT模型细胞、放射抗拒TE13R120细胞为研究对象，通过Real-time PCR和Western blot检测EMT标记物mRNA和蛋白表达，验证EMT模型的建立和TE13R120存在EMT样表型。Real-time PCR比较NRAGE在3组细胞中mRNA水平的表达情况，Western blot检测3组细胞中NRAGE总蛋白及胞质、胞核蛋白的表达。
结果TGF-β1诱导TE13细胞形态向间质型细胞转化，EMT标志物E-cadherin和Vimentin表达发生改变(t＝13.56、－232.84，P<0.05)，成功建立EMT模型细胞。放射抗拒TE13R120细胞中EMT标记物表现出与EMT模型细胞相似的趋势(t＝15.84、－54.54，P<0.05)。NRAGE在EMT模型细胞、TE13R120细胞中的表达较TE13细胞明显上调，且均在细胞核内表达明显升高(t＝－8.73、－5.62, P<0.05)，而在细胞质中表达差异无统计学意义。NRAGE在EMT模型细胞和TE13R120细胞胞质、胞核中的表达差异均无统计学意义。
结论放射抗拒TE13R120细胞存在EMT样表型，且其放射抗性的形成可能因EMT的发生参与了NRAGE亚细胞定位的改变而导致。