【摘 要】
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该研究旨在探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖的影响及抗癌生物活性肽(ACBP)对增殖的干预作用和可能的作用机制.收集5例手术切除患者的食管癌组织,分离培养得到ESCC CAFs并进行特征指标鉴定;建立CAFs与ESCC细胞共培养体系,CFSE染色和流式细胞术检测细胞增殖;收集CAF-1的条件培养基,加入ACBP进行联合培养KYSE140细胞,IncuCyte检测细胞增殖;qRT-PCR和Western blot检测Hedgehog信号通路相关基因的表达水平.该研究成功分
【机 构】
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内蒙古医科大学附属医院临床医学研究中心,内蒙古医学细胞生物学重点实验室,呼和浩特010050;内蒙古医科大学附属医院胸外科,呼和浩特010050
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该研究旨在探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖的影响及抗癌生物活性肽(ACBP)对增殖的干预作用和可能的作用机制.收集5例手术切除患者的食管癌组织,分离培养得到ESCC CAFs并进行特征指标鉴定;建立CAFs与ESCC细胞共培养体系,CFSE染色和流式细胞术检测细胞增殖;收集CAF-1的条件培养基,加入ACBP进行联合培养KYSE140细胞,IncuCyte检测细胞增殖;qRT-PCR和Western blot检测Hedgehog信号通路相关基因的表达水平.该研究成功分离CAFs,Western blot结果显示CAFs均表达波形蛋白(Vimentin)及纤维连接蛋白(Fibronectin),不表达E-钙黏蛋白(E-cadherin);相比于单独培养,与CAF-1共培养的KYSE140细胞的CFSE水平降低,细胞融合率增加(P＜0.05),细胞中的GLI1和PTCH1的mRNA和蛋白水平升高(P＜0.05);相比于条件培养基组,ACBP加入可以使KYSE140细胞的融合率下降(P＜0.05);相较于单独培养,ACBP加入后KYSE140细胞的GLI1和PTCH1的mRNA和蛋白水平显著下降(P＜0.05).该研究表明,CAFs可以通过激活Hedgehog信号通路促进食管癌细胞增殖,ACBP可在与CAFs共培养条件下通过抑制Hedgehog信号通路抑制食管癌细胞的生长.
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