【摘 要】
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[目的]建立检测产志贺毒素性大肠杆菌(STEC) stx2基因荧光定量 PCR方法。[方法]根据 GenBank中已发表的 STEC stx2基因序列，在保守区域设计 PCR引物和探针，构建重组质粒作为阳
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所，农业部兽用生物制品工程技术重点实验室，国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京 210014安徽医科大学口腔医学院,安徽合肥,230032;
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[目的]建立检测产志贺毒素性大肠杆菌(STEC) stx2基因荧光定量 PCR方法。[方法]根据 GenBank中已发表的 STEC stx2基因序列，在保守区域设计 PCR引物和探针，构建重组质粒作为阳性模板，优化反应条件，建立荧光定量PCR方法。[结果]利用优化的荧光定量 PCR反应体系建立了标准曲线。表明起始模板浓度与 Ct值之间线性关系好，相关系数R2均达0.995以上；此方法特异性好，对10种非 STEC肠道病菌无特异性扩增；敏感性高，初始模板的检出下限达1.0×102拷贝数/μl；重复性好，批内、指间变异系数均分别小于1%和5%。[结论]该研究成功建立了检测 STEC stx2基因的荧光定量 PCR方法，为快速检测样品中 STEC提供了技术手段。
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