【摘 要】
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目的制备抗肺炎支原体(MP)的特异性单克隆抗体,利用单克隆抗体建立MP胶体金快速检测方法。方法采集急性呼吸道感染患儿咽拭子标本,分离培养并鉴定MP,纯化MP抗原,制备抗MP单抗
【机 构】
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西安交通大学医学院,陕西省安康市中心医院输血科,陕西省人民医院中心实验室
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目的制备抗肺炎支原体(MP)的特异性单克隆抗体,利用单克隆抗体建立MP胶体金快速检测方法。方法采集急性呼吸道感染患儿咽拭子标本,分离培养并鉴定MP,纯化MP抗原,制备抗MP单抗,利用单抗建立MP胶体金检测试纸条。取疑似MP感染患者的咽拭子标本,分别使用荧光定量PCR法和胶体金快速检测法对其进行检测,观察并统计检查结果。结果成功分离培养出MP菌株,灭活并纯化出MP抗原,利用该抗原免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备出抗MP单克隆抗体19株,从中选出效价高、特异性较好的两株单克隆抗体(MP-5和MP-19)作为原材料制备MP胶体金快速检测试纸条。胶体金试纸条最低检测限为20ng。分别采用胶体金试纸条和荧光定量PCR法对临床标本进行检测,结果显示,本研究制备的MP胶体金快速检测法的灵敏度为88.2%,特异度为82.6%。结论制备出抗MP的特异性单克隆抗体,已初步建立MP胶体金快速检测法,并为临床MP感染患者的快速诊断提供帮助。
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