胶质细胞源性神经营养因子受体α1定点突变体制备及其稳定转染细胞株的构建及鉴定

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yjm17207928

【摘要】

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目的:制备胶质细胞源性神经营养因子受体α1(GFRα1)的突变体质粒,并建立rGFRα1各突变体和RET基因双转染的稳定RCE细胞株.方法:通过Fugene6脂质体转染试剂,将PCR法快速制备

【作者】

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朱伟张勇陈哲宇王丽梅路长林何成

【出处】

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第二军医大学学报

【发表日期】

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2004年10期

【关键词】

：

胶质细胞源性神经营养因子受体α1(GFRα1) RET PC12细胞 glia cell line-derived neurotrophic factor re

【基金项目】

：

国家自然科学基金(30370454),国家杰出青年基金(30325022),国家重点基础研究规划"973"计划课题(2002CB713808),国家教育部跨世纪优秀人才培养计划(2003年).

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目的:制备胶质细胞源性神经营养因子受体α1(GFRα1)的突变体质粒,并建立rGFRα1各突变体和RET基因双转染的稳定RCE细胞株.方法:通过Fugene6脂质体转染试剂,将PCR法快速制备的pcDNA3-rGFRα1突变体质粒分别与带潮霉素B抗性筛选标记的pcDNA3.1-RET质粒共转染野生型PC12细胞,建立rGFRα1各突变体和RET基因双转染的稳定PC12细胞株.经Western印迹和细胞免疫荧光化学方法对转染入PC12细胞中的各rGFRα1突变体基因和RET基因的表达进行鉴定.结果:West

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