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为研究湖南宽皮柑橘的血缘与起源关系,以湖南宽皮柑橘为试验材料,探讨EST-SSR分子标记的反应体系。结果表明：设计并筛选了20对引物,其中12对引物扩增多态性较高,研究确定在25μl的反应体系中,Mg2＋浓度在2.5mmol/L,dNTP0.2mmol/L,上下引物各为0.2μmol/L,Taq酶浓度为1.0U效果好,最佳PCR程序为94℃预变性1min,然后94℃,1min;52℃,1min;73℃,1min,45个循环,最后73℃延伸3min,利用优化后的反应体系成功构建湖南宽皮柑橘EST-SSR的指