342bp人骨形态发生蛋白2成熟肽基因的克隆表达

来源 :现代中西医结合杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huaqizhang
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目的 探讨克隆人骨形态发生蛋白2(hBMP2)成熟肽的最精简的基因序列并原核表达方法。方法 剔除所有信号肽和中间前肽的非必需基因序列,以RT—PCR方法克隆扩增出hBMP2的342bp的成熟肽基因片段,将其与原核表达载体PBV220酶切后相连接并测序,构建PBV220-hBMP2的真核基因原核表达系统,在DH5α大肠杆菌下扩增并温度诱导表达hBMP2蛋白质,SDS—PAGE检测表达蛋白。结果 RT—PCR扩增出hBMP2的成熟肽基因342bp片段与Genbank公布的序列完全一致,且经DNA电泳和蛋白电泳
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