【摘 要】
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目的：构建及表达抗人CD80单链抗体（ScFv）,并初步研究其生物学功能。方法：采用RT-PCR法从分泌鼠抗人CD80mAb的杂交瘤细胞株（4E5）中克隆VH和VL基因。用重叠延伸拼接PCR方法构建具有前
【机 构】
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苏州大学医学部免疫学系,河南中医学院第一附属医院检验科,中国科学院苏州纳米研究所
【基金项目】
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本文为国家科技重大专项资助项目（2009ZX09103-705）
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目的：构建及表达抗人CD80单链抗体（ScFv）,并初步研究其生物学功能。方法：采用RT-PCR法从分泌鼠抗人CD80mAb的杂交瘤细胞株（4E5）中克隆VH和VL基因。用重叠延伸拼接PCR方法构建具有前导肽的L-VH-Linker-VL单链抗体基因,并亚克隆至pIRES2-EGFP表达载体,脂质体法转染中华仓鼠卵巢细胞（CHO）,G418加压筛选。纯化抗CD80-ScFv,并分析其对膜型CD80的识别。竞争抑制实验分析抗CD80-ScFv与相应抗原的结合能力。MTT法体外分析抗CD80-ScFv对CD8
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