论文部分内容阅读
利用差减杂交（减法杂交，subtractivehybridization）技术，以旋毛虫新生幼虫（newbornlarvae,NBL）的cDNA作为试验方（tester），以肌幼虫+成虫的cDNA作为驱动方（driver），制备新生幼虫差减cDNA；利用T载体构建NBL差减cDNA文库，获克隆株90个。以试验方的差减cDNA第2次PCR产物+未差减cDNA为试验方探针，以驱动方的差减cDNA第2次PCR产物+未差减cDNA为驱动方探针，在NBL差减cDNA文库中初筛NBL的期特异性克隆，获初筛克隆24个。这些初筛期特异性克隆进一步用Southernblot确认鉴定，获真阳性期特异性克隆2个（NBLSSC1,NBLSSC2）。DNASIS以及Blaster的分析结果显示，这2个克隆为旋毛虫的2个新基因，其中NBLSSC1编码糖蛋白，NBLSSC2编码丝氨酸蛋白酶。本试验为旋毛虫期特异性基因全长序列的调取、分析、鉴定以及强保护性抗原基因的筛选奠定了基础。