【摘 要】
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本实验旨在对乳品中酵母菌活菌总数进行准确的定量检测,深入研究PMA处理乳品中酵母热损伤菌的最佳工作条件,去除热损伤死菌DNA的影响。针对从乳品中分离的三株酵母菌26S rDNA
【机 构】
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工商学院粮油食品深加工吉林省高校重点实验室; 人兽共患病研究教育部重点实验室吉林大学人兽共患病研究所吉林大学动物医学学院; 吉林广泽乳业有限公司;
【基金项目】
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吉林省重点科技攻关项目(20170204021SF);吉林省重点科技攻关项目(20140204065NY);吉林省教育厅十三五产业化项目(JJKH20170190KJ);粮油食品深加工省高校重点实验室项目(2016003)
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本实验旨在对乳品中酵母菌活菌总数进行准确的定量检测,深入研究PMA处理乳品中酵母热损伤菌的最佳工作条件,去除热损伤死菌DNA的影响。针对从乳品中分离的三株酵母菌26S rDNA D1/D2区域序列设计引物Y3和Y4,运用实时荧定定量PCR进行序列扩增,以重组质粒pMD-18T-26S拷贝数对数与扩增循环数(Ct)值为坐标轴建立标准曲线,建立PMA-qPCR检测方法,并对实际样品中的酵母菌活菌富集后进行数量检测。PMA-q PCR法可达到国标规定的食品中酵母菌最高限量值1×10~2CFU/mL的检测标准,对应Ct值为36.67±0.43,重复性良好,总耗时6～7 h,可对酵母菌数量进行准确和快速的定量分析,为乳品中腐败微生物的鉴定与监控提供有价值的借鉴。
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