【摘 要】
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目的 探讨神经生长因子(NGF)对体外培养人结膜杯状细胞增殖与黏蛋白MUC5AC基因表达的影响.方法 利用抗NGF高亲和力受体(TrkA)的单克隆抗体进行免疫组织化学染色,初步检测杯状
【机 构】
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首都医科大学北京同仁眼科中心北京市眼科研究所
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目的 探讨神经生长因子(NGF)对体外培养人结膜杯状细胞增殖与黏蛋白MUC5AC基因表达的影响.方法 利用抗NGF高亲和力受体(TrkA)的单克隆抗体进行免疫组织化学染色,初步检测杯状细胞膜表面是否存在此受体.在传代的人结膜杯状细胞中加入含20、40、60及80 ng/mlNGF的RPMI-1640培养液,加入不含NGF的培养液作为阴性对照.于加药后1、3、5 d分别用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察细胞增殖情况.加入含80 ng/ml NGF的培养液后第5天,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测NGF对杯状细胞中MUC5AC基因表达的影响.结果 人结膜杯状细胞膜表面存在NGF高亲和力受体(TrkA).加入NGF后不同时间(F=12.766,P=0.000)、不同浓度组(F=892.406,P=0.000)之间的吸光度值比较,差异有统计学意义,时间和浓度这两个因素之间无交互作用(F=1.778,P=0.095).NGF组MUC5AC的mRNA表达量明显高于对照组(t=4.963,P=0.000).结论 体外培养的人结膜杯状细胞膜表面存在NGF高亲和力受体;NGF有促进杯状细胞增殖的作用,并随浓度增加和时间的延长而促增殖作用增强;NGF能够促进杯状细胞黏蛋白MUC5AC基因表达.
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