双控表达载体系统的构建及其在基因表达方面的应用

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可严格调控性是体现原核表达载体优越性的重要指标.构建了一种双控双调节原核表达载体系统,用双载体控制调节目的基因的表达,即SP6启动子(promoter)+乳糖(lac)调节基因表达系统和araB启动子(promoter)+ araC调节基因表达系统,分别由乳糖类似物IPTG和阿拉伯糖(L-arabinose)诱导目的基因的表达.该系统由2个表达载体共同完成目的基因的表达.pESP-1为主表达载体,即目的基因克隆到此表达载体上,由SP6启动子(promoter)+乳糖(lac)调节基因调控;pARA-SP6为辅助表达载体,该载体通过SP6 RNA聚合酶的表达来控制调节主表达载体的启动子(SP6),由araB启动子(promoter)+ araC调节基因调控.实验结果显示该双控双调节表达载体系统控制严格,并且表达蛋白的量具有可调控性.
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