【摘 要】
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目的 研究地胆草提取物对肝癌HepG2细胞增殖、迁移、血管生成拟态的作用和机制.方法 取对数生长期HepG2肝癌细胞,分为对照组(0.1％DMSO)和不同浓度实验组(地胆草提取物质量浓度分别为25,50,75,100,125,150μg·mL-1).以噻唑蓝(MTT)比色法测定地胆草提取物对HepG2细胞增殖的影响;根据MTT结果,设对照组(0.1％DMSO),低浓度实验组(75μg·mL-1),高浓度实验组(125μg·mL-1)开展后续实验.以细胞划痕实验和体外血管生成实验检测地胆草提取物对HepG2
【机 构】
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右江民族医学院 药学院,广西壮族自治区百色533000;广西医科大学 第二附属医院 药学部,广西壮族自治区 南宁530000
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目的 研究地胆草提取物对肝癌HepG2细胞增殖、迁移、血管生成拟态的作用和机制.方法 取对数生长期HepG2肝癌细胞,分为对照组(0.1％DMSO)和不同浓度实验组(地胆草提取物质量浓度分别为25,50,75,100,125,150μg·mL-1).以噻唑蓝(MTT)比色法测定地胆草提取物对HepG2细胞增殖的影响;根据MTT结果,设对照组(0.1％DMSO),低浓度实验组(75μg·mL-1),高浓度实验组(125μg·mL-1)开展后续实验.以细胞划痕实验和体外血管生成实验检测地胆草提取物对HepG2细胞迁移、血管生成拟态的影响;以蛋白质印迹(Western Blot)法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测血管内皮生长因子A(VEGFA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-3、MMP-9蛋白和mRNA的表达水平.结果 地胆草提取物剂量依赖性抑制HepG2细胞的增殖,作用48 h的IC50为(89.47±1.54)μg·mL-1.对照组和低、高浓度实验组迁移率分别为(11.68±0.80)％,(5.53±0.44)％和(-8.17±1.95)％;体外成管实验显示,对照组、低、高实验浓度组管腔数量分别为39.80±5.97,32.60±2.61和11.00±5.83,管腔面积分别为1.24×104±2833.10,8257.70±2244.00和6674.50±1217.60,低、高浓度实验组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).与对照组相比,低、高实验浓度组均可降低VEGFA、MMP-2、MMP-9的表达(均P<0.05),而对MMP-3的表达无明显影响.结论 地胆草提取物可能通过下调VEGFA、MMP-2、MMP-9的表达发挥抑制肝癌细胞增殖、迁移及体外血管生成拟态的作用.
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