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目的
获得含有鼠疫F1和V抗原编码基因的重组真核表达质粒pVAX1/F1-V，并测定其诱导特异性免疫应答的能力。
方法PCR扩增鼠疫菌F1和V编码基因，分别与pGEM-T连接测序，构建pVAX1/F1-V融合重组质粒，转染Cos-7细胞，用Western blot方法鉴定目的蛋白的表达，重组质粒pVAX1/F1-V加GM-CSF佐剂免疫BALB/c小鼠，观察免疫效果，400个半数致死量（LD50）强毒鼠疫菌皮下攻毒观察保护率。
结果pVAX1/F1-V在Cos-7细胞中表达，免疫鼠体内产生特异性抗体，通过抗体亚型分析、细胞因子等指标的测定表明所构建DNA疫苗以诱发TH1型免疫为主，攻毒保护率达60%。
结论成功构建F1-V融合蛋白真核表达载体，具有诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答的能力，对强毒鼠疫菌皮下攻毒有一定的保护效力，为鼠疫菌新型疫苗研制奠定了基础。