【摘 要】
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目的 探讨谷氨酸信号通路在黑素转运中的作用.方法 原代培养并纯化黑素细胞及角质形成细胞,免疫荧光显微镜观察离子型谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2A( NMDAR2A)在黑素细胞内的分布,共聚焦显微镜观察100 μmol/L NMDAR激动剂NMDA和100μmol/L拮抗剂地卓西平马来酸盐(dizocilpine maleate,MK801)作用
【机 构】
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116021,大连医科大学附属第一医院皮肤科,中英再生医学应用研究中心,辽宁师范大学生命科学学院生物技术与分子药物研发重点实验室,中英再生医学应用研究中心,辽宁师范大学生命科学学院生物技术与分子药物研
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目的 探讨谷氨酸信号通路在黑素转运中的作用.方法 原代培养并纯化黑素细胞及角质形成细胞,免疫荧光显微镜观察离子型谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)和N-甲基-D-天冬氨酸受体2A( NMDAR2A)在黑素细胞内的分布,共聚焦显微镜观察100 μmol/L NMDAR激动剂NMDA和100μmol/L拮抗剂地卓西平马来酸盐(dizocilpine maleate,MK801)作用5 min和1h后黑素细胞内钙离子浓度的变化以及100 μmol/L MK801对黑素细胞内微管蛋白的影响.结果 100 μmol/L NMDA可使黑素细胞内瞬时钙离子浓度升高,但100μmol/L MK801可使其降低;MK801先作用于黑素细胞5 min或1h阻断NMDA受体后,NMDA均不能再次诱导瞬时钙离子浓度升高.共聚焦显微镜观察发现MK801作用24 h后,胞内微管蛋白重新分布聚集于核周.扫描电镜观察发现100 μmol/L MK801作用于黑素细胞-角质形成细胞共培养体系48 h后,黑素细胞和角质形成细胞之间以及两种细胞表面的丝状伪足数量明显减少.共培养体系下,100μmol/L MK801作用后,角质形成细胞中的黑素含量明显降低,即从黑素细胞向角质形成细胞转移的黑素数量明显减少.结论 谷氨酸信号通路对黑素细胞胞内钙离子浓度、微管蛋白分布、黑素细胞伪足形成以及黑素细胞及角质形成细胞间的黑素转运具有一定调节作用。
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