【摘 要】
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为构建鸡RAC1基因真核表达载体并观察该载体是否在鸡卵泡颗粒细胞中表达,试验采用PAS方法合成RAC1基因,先将其克隆至pUC57-simple载体中,然后再亚克隆至表达载体pYr-adshuttle-4上,将重组载体瞬时转染至鸡卵泡颗粒细胞中,通过荧光定量PCR和Western Blot进行验证.结果 表明,剧C1基因正确地插入到了载体pYr-adshuttle-4的多克隆位点,且重组载体转染成功.试验成功构建了鸡源pYr-adshuttle-4-RAC1真核表达载体,并成功将其转入到鸡卵泡颗粒细胞中.
【机 构】
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吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118
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为构建鸡RAC1基因真核表达载体并观察该载体是否在鸡卵泡颗粒细胞中表达,试验采用PAS方法合成RAC1基因,先将其克隆至pUC57-simple载体中,然后再亚克隆至表达载体pYr-adshuttle-4上,将重组载体瞬时转染至鸡卵泡颗粒细胞中,通过荧光定量PCR和Western Blot进行验证.结果 表明,剧C1基因正确地插入到了载体pYr-adshuttle-4的多克隆位点,且重组载体转染成功.试验成功构建了鸡源pYr-adshuttle-4-RAC1真核表达载体,并成功将其转入到鸡卵泡颗粒细胞中.该载体的构建为进一步研究RAC1的生物学功能提供了重要工具.
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