【摘 要】
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以仅产阿维菌素(avermectin)B和寡霉素(oligomycin)的阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)CZ8-73为出发菌株,构建基因缺失载体pXL05(pKC1139::△olmAl+△olmA4),并将其转入
【机 构】
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中国农业大学生物学院微生物系; 中国农业大学生物学院微生物系 北京 100094; 北京 100094; 北京 100094;
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以仅产阿维菌素(avermectin)B和寡霉素(oligomycin)的阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)CZ8-73为出发菌株,构建基因缺失载体pXL05(pKC1139::△olmAl+△olmA4),并将其转入CZ8-73中,通过缺失质粒和染色体之间的同源双交换,对染色体上长达90 kb的寡霉素PKS基因簇(olmA)进行了缺失突变.将4株经Southern杂交验证正确的基因缺失突变株进行摇瓶发酵和HPLC检测,发现4个突变株均不再产生寡霉素而仅产阿维菌素B组分,阿维菌素的总产量和B1的产量与出发菌株相当,说明寡霉素PKS基因簇的缺失并不影响阿维菌素的生物合成.该缺失突变是在染色体上通过同源双交换完成的,不会发生进一步的重组,因此突变株性状稳定,在工业生产上具有应用价值.
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