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疏螺旋体属包括多个人类的致病菌，如引起莱姆病的伯氏疏螺旋体（ Bor-relia burgdorferi）。疏螺旋体的基因组结构特殊，包括染色体和约20个大小不等的质粒。一些质粒在传代培养过程容易丢失，然而却是维持病原菌感染性所必需的。疏螺旋体的单菌落分离及纯培养不能按照常规的微生物学方法进行，因为该菌株只能在复杂的 BSK （ Barbour-Stoenner-Kelly）培养基中缓慢生长。疏螺旋体是一种不好氧的细菌，常规的涂布平板法和平板划线法不利于菌株的生长。本研究利用双层琼脂平板的方法进行疏螺旋体的单菌落分离及纯化，操作简单快速，便于获得遗传背景单一的单克隆菌株。