【摘 要】
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为实现马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）常见株系的快速鉴定,本文以PVY的P1、HC-pro、VPg和CP 4个基因为研究对象建立了快速准确的多基因联合体系。根据基因的不同组合建立5个
【机 构】
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福建农林大学植物病毒研究所/福建省植物病毒学重点实验室,福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心/福建省检验检疫技术研究重点实验室,福清出入境检验检疫局综合技术服务中心,福建农林大学闽台特色作物病虫生态防
【基金项目】
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国家现代农业马铃薯产业技术体系(编号:CARS-10);国家重点研发计划项目(编号:2016YFF0203203);福清市科技计划项目(编号:FQ201501)资助~~
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为实现马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）常见株系的快速鉴定,本文以PVY的P1、HC-pro、VPg和CP 4个基因为研究对象建立了快速准确的多基因联合体系。根据基因的不同组合建立5个不同数据集,分别进行系统发育分析,并通过贝叶斯标签关联显著性（Bayesian tip-association significance,Ba TS）分析各数据集中代表分离物与株系的关联性,以确定实现PVY快速鉴定的最佳组合。不同数据集的系统发育及Ba TS分析结果显示,除了联合P1、VPg和CP 3个基因数据集外,其他4个数据集均无法实现PVY常见株系的准确鉴定。采用不同建树方法对联合P1、VPg和CP 3个基因数据集比较分析显示,基于ML法和NJ法的系统发育树在拓扑结构上基本一致,均优于基于贝叶斯算法的最大分支置信（maximum clade credibility,MCC）树。同时,以HLJ26分离物为研究对象,对建立的多基因联合体系进行实际应用,结果显示该分离物与PVYNTN-NW株系的3个分离物SYR-Ⅱ-2-8、SYR-Ⅱ-Be1和SYR-Ⅱ-Dr H以高置信值聚为一亚簇,表明该分离物可能属于PVYNTN-NW株系（SYR-Ⅱ型）。重组分析显示,HLJ26基因组存在4个潜在的重组信号,分别位于P1、HC-pro/P3、VPg和CP的5￠-末端,与PVYNTN-NW株系（SYR-Ⅱ型）的重组位点相一致,表明其属于PVYNTN-NW株系（SYR-Ⅱ型）。同时,应用多重RT-PCR成功扩增出约为1000 bp和400 bp的2个特异性片段,与PVYNTN-NW株系（SYR-Ⅱ型）的特异条带大小相一致。这些结果进一步支持了多基因联合体系的鉴定结果。联合P1、VPg和CP 3个基因数据集系统发育分析,可以实现PVY常见株系的准确鉴定。
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