不同样本类型对EBV DNA检测结果的影响

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  摘要:目的:对临床血浆样本、外周血PBMC样本与咽拭子样本的EBV DNA阳性率以及相关计数情况进行对比,以分析有关样本对最终检验结果所带来的影响,评价样本及方法的灵敏度。方法:在本院所有所收治接诊的疑似为EBV感染的90例患儿作为本次研究的对象,对其采取血浆样本、PBMC样本及咽拭子样本的采集,并观察所有患儿最终结果的阳性率是否有明显的差异,对其敏感度情况进行观察,评价相关样本的影响作用。结果:90例患儿最终检查的结果可以发现,三种检验结果彼此之间的阳性率之间形成了明显不同,从低到高依次为血浆、外周血PBMC和咽拭子标本,尤其以咽拭子标本为最高且明显高于外周血PBMC与血浆检查,灵敏度最强(P<0.05)。但在EBV DNA方面,外周血PBMC与咽拭子的相关结果未呈现明显不同(P>0.05),两项结果接近,而且明显比血浆检查结果更高(P<0.05)。结论:在临床对EB病毒筛查的过程中。咽拭子标本的敏感性最强,阳性率最高,在EBV DNA方面与外周血PBMC接近,但是其阳性率却明显较高,可以结合实际情况选择相应的标本进行疾病监测,以促使早期诊断积极进行干预。
  关键词:EB病毒;小儿;DNA;咽拭子;外周血PBMC;血漿;结果;影响
  【中图分类号】R446.5  【文献标识码】A  【文章编号】1673-9026(2020)07-034-01
  引言:
  EB病毒是临床常见的一种疱疹病毒,尤其在小儿群体中发生感染的情况更多,作为一种传染性单核细胞增多症的病原体,在小儿群体中尤为常见,一般以呼吸道感染为主要症状,严重情况下可以累及全身多个脏器产生问题,感染之后以B淋巴细胞为主要攻击的细胞,在其中增殖并感染其他细胞[1]。而此类病毒感染之后带来的较为典型性症状影响包括了发热、淋巴结肿大,引起咽峡炎等一系列问题,主要以呼吸道症状和全身症状为主。EB病毒的感染很容易被漏诊,进行诊断和治疗的过程中,尤其要关注其方法和标本的使用,合理选取标本进行前期检查诊断,为后续干预提供诊断依据和支持[2]。针对这一特点,本次研究主要是采取实时荧光聚合酶联反应(PCR)定量检测,对不同的样本阳性率、EBV DNA情况进行对比,以评价哪一种标本阳性率更高敏感性更强一些。
  1.资料与方法
  1.1一般资料
  90例患儿均为本院所收治高度疑似为EBV感染的患儿群体,其年龄在4-12岁之间,平均(6.14±1.36)岁,伴有明显的淋巴结肿大、咽喉疼痛、发热咳嗽等问题,临床诊断为肺炎、支气管炎等等。所有患儿既往体健,没有明确的免疫系统疾病或者凝血功能障碍等一系列问题,在此之前没有使用过抗病毒、抗感染治疗,基础情况接近,不会影响最终结果准确性。
  1.2方法
  对所有患儿都进行血液标本和咽拭子标本采集,抽取静脉全血2ml,使用乙二胺四乙酸进行抗凝然后离心分离血浆,留取血浆100ul进行EBV DNA提取,剩余全血标进行外周血的单个核细胞(PBMC)EBV DNA提取。咽拭子标本方面,按照有关要求进行采集,并密封进行送检,无法及时检测的存储于零下20摄氏度环境,尽早进行检测[3]。使用ABI 7300/7500荧光定量扩增仪配合相关试剂,按照相关操作规范进行DNA模板提取,并在反应管内加入阴性质控品、质控品和参考品以及待检测标本各2ul进行检测。
  1.3观察指标
  观察所有患儿在三种标本同样方法检测之后的阳性率、EBV DNA对数值方面是否形成了明显差异。
  1.4统计方法
  所有数据利用SPSS.20.0统计学软件进行统计学数据处理,计量资料用均数±标准差(x+s)进行表示,采用t检验,当P<0.05时,表示差异较为显著,具备统计学意义。
  2.结果
  分别采取三种标本的结果对比发现,以咽拭子标本的阳性率最高,明显高于外周血PBMC与血浆(P<0.05),而在EBV DNA方面,其结果与外周血PBMC相近(P>0.05),但均明显大于血浆检查(P<0.05)。三种标本的最终阳性率与EBV DNA结果情况对比详见表1.
  3.结论
  EB病毒感染的问题在临床儿科十分常见,其发生率相对较高,由于免疫力差异导致患儿的临床症状也有明显不同,早期进行诊断对于后续治疗影响十分明确[4]。根据不同标本差异发现,咽拭子的阳性率更高,这主要是其分泌物是病毒传播的主要载体,故而其阳性率更高。而外周血PBMC作为感染病毒后主要载体,感染之后主要攻击B淋巴细胞上受体,所以其阳性率比血浆要更高一些。
  如上所述,在临床不同标本进行检验的过程中发现,咽拭子检查的阳性率最高,在早期诊断的过程中选取相关方法取得的效果更好一些,有助于早期诊断和早期疾病治疗。
  参考文献:
  [1] 陈世知,谢运兰,梅严花,et al.传染性单核细胞增多症患者不同标本EBV-DNA检测的临床价值[J].国际检验医学杂志,2018,39(02):53-55+58.
  [2] Lorusso F ,Caleca M P ,Bellavia C ,et al.The EBV-DNA Can be Used as a Diagnostic and Follow-up Parameter of the Rhinopharyngeal Tumors in the Non-Endemic Population of the Western Sicily[J].Indian Journal of Otolaryngology and Head & Neck Surgery,2018,71-71.
  [3] 张晴,崔蕾,马宏浩,et al.血浆及全血EB病毒DNA对EB病毒相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症患儿预后的影响[J].中华实用儿科临床杂志,2020,35(15):1138-1143.
  [4] 彭惠轩,麦彩喜,陈广道.EB病毒DNA检测对儿童传染性单核细胞增多症的诊断价值及其影响因素[J].国际医药卫生导报,2018,024(004):491-493.
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