一种共沉淀回收构建载体的新方法

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[目的]介绍一种新型的载体构建方法。[方法]利用乙醇可以使酶切反应中内切酶变性失活的特性对酶切产物进行回收和纯化,再将得到的混合沉淀溶解进行连接、转化。[结果]16—20h长出单菌落进行PCR鉴定,转化后的单菌落有10%的阳性率,将阳性菌落提取质粒进行酶切鉴定,电泳条带正确,载体构建成功。[结论]利用产物混合回收方法成功构建了植物表达载体pCambia1301cry3Aa,且省去酶切步骤,证明该方法是一种简便、实用的方法,具有一定的经济价值。
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