【摘 要】
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目的:探讨Kri1l基因突变对斑马鱼脑部发育的影响.方法:通过正向遗传学的手段发现Kri1 l基因突变的斑马鱼系,在光镜下观察野生型与突变型的表型.采用全胚胎原位杂交技术,检测
【机 构】
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包头医学院基础医学与法医学院,内蒙古 包头014040;包头医学院神经科学研究所;内蒙古自治区低氧转化医学重点实验室;包头市第三医院;包头医学院药学院;首都医科大学宣武医院低氧适应转化医学北京市重点实
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目的:探讨Kri1l基因突变对斑马鱼脑部发育的影响.方法:通过正向遗传学的手段发现Kri1 l基因突变的斑马鱼系,在光镜下观察野生型与突变型的表型.采用全胚胎原位杂交技术,检测神经发育相关转录因子sox2的表达情况.为了进一步探究脑部神经发育异常,用Tg(Kri1l+/-)与Tg(HuC:EGFP)泛神经元转基因鱼系进行杂交,得到Tg(Kri1l+/-;HuC:EG-FP)双转基因系,绿色荧光标记神经元.利用激光共聚焦显微镜观察野生型和突变型胚胎脑部神经元的变化;通过TUNEL染色观察脑部神经元细胞凋亡的情况.结果:在光镜下Kri1 l突变胚胎的中脑区域变小,神经元明显减少.通过激光共聚焦显微镜观察Tg(Kri1l+/-;HuC:EGFP)双转基因系的脑部神经元,发现Kri1 l突变型胚胎脑部神经元明显减少,且神经元的减少开始于受精二天之后.通过全胚胎原位杂交发现,脑部早期神经干细胞发育没有异常.TUNEL染色结果提示Kri1 l突变胚胎神经元凋亡增加.结论:Kri1 l基因突变导致斑马鱼脑部发育异常,其机制可能是通过引起脑部神经元的凋亡来实现的.
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