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摘要：医院是人流量大，且空气细菌数量多，种类复杂的公共场合。其空气细菌含量的检测对预防疾病和细菌感染具有重要意义。本实验用自然沉降法采集医院空气细菌，通过对培养皿暴露时间长短的不同进行细菌计数。结果表明，空气中的细菌并没有随培养皿暴露的时间越长而增多，这为自然沉降法测定细菌数和医院的清洁消毒工作提供了参考依据。
关键词：自然沉降法;空气细菌;培养皿暴露时间
医院感染问题是世界范围内瞩目的难题，如果医院性感染大暴发，不仅会导致大量医疗资源的浪费，以及加重患者的经济负担，而且严重的甚至会引起社会恐慌，因此，要加强对医源性感染的认识和理解，特别是提高医护工作人员的思想意识[1]。
目前针对医院感染的控制，关键是在于控制感染源、自身预防和切断传播途径。空气传播途径包括飞沫、飞沫核和尘埃传播方式，是细菌传播的主要途径之一。其传播范围广，传播速度快，途径易实现且发病率高，对患者和儿童、老人等免疫力低下的人群感染性极高。因此检测空气中细菌含量是公共区域空气质量和卫生的参数之一。此外，对于医院病区的清洁消毒的质量，特别是微生物检测的结果缺少深入调研，基础数据匮乏。因此，本实验通过对医院大厅的空气细菌进行采样、检测和初步分析，为医院感染预防提供了基础数据，并为医院的清洁消毒工作提供了参考。
1 实验条件与方法
1.1 实验材料
牛肉膏蛋白胨营养琼脂、蒸馏水。
1.2 实验仪器和设备
培养皿、锥形瓶、烧杯、量筒、高压灭菌锅、超净工作台、恒温培养箱、电子秤、酒精灯、牛皮纸、滤纸、纱布。
1.3 实验设计及过程
1.3.1 消毒灭菌
对实验需要使用的所有器具用蒸馏水洗净并进行灭菌，采用高压蒸汽灭菌法，103.4KPa，121.3℃，30min。
1.3.2 配制培养基
准备培养皿，取40个大小相同，规格为直径9cm的培养皿。利用营养琼脂制作培养基，培养基应颜色不深、无絮状物、无沉淀、无分层以及无气泡为佳[2]，然后进行高压蒸汽灭菌，30分钟，分装后进行无菌检查，24-48小时后取出观察，若无细菌生长则为合格。
1.3.3 放置取样
（1）采菌地点：某医院的大厅（室内面积>30m2）。
（2）采样方法：采取自然沉降法，由于室内面积>30m2，因此可以选取房间五点采取法，设房间四角及中央5点，4角采样点距墙1m处，都距离地面0.5m，采样时间分别为5min，10min，15min，每次采取分为五组。采样结束后扣上皿盖，用记号笔做好标记。
1.3.4 培养
将采集好的培养皿倒置并用纱布包裹，迅速送至培养箱进行细菌培养，培养时间为2448小时。在整个过程中都要做好样品质量及采样过程质量的控制，提高结果准确性及可行性[3]。
1.3.5 数据处理
对每个培养基上的细菌总数进行计数，并统计数据。然后用SPSS19对数据进行t检验，以P<0.05有统计学意义。
2 实验结果
根据采样结果可将实验所得结果进行不同时间段以及采菌布点进行分析。根据统计数据，通过t检验可得结果：平皿暴露5min和10min的数据处理后，P=0.11，P>0.05，表明平皿暴露5分钟和10分钟对细菌数量变化影响不大;平皿暴露5min和15min的数据t检验得出结果P=0.06，P>0.05，表明平皿暴露5分钟和15分钟对细菌数量变化影响不大。由此可见，自然沉降法中，平皿暴露时间并不是越长越好，5分钟、10分钟和15分钟测得的数据并无显著差异。
各采样点不同时间段细菌菌落数的比较表
5min10min15min中112034东南615758东北184745西北102147西南495858
3 结果分析与讨论
通过数据对五个地点进行培养皿暴露時间的比较，得出同一方位的细菌总数含量并不随时间的增长而增加，因此，人们不用担心在医院的时间越长，越易发生医源性感染。通过对不同方位进行比较，发现东南和西南的细菌总数明显多于西北和东北的细菌总数，由于做实验时，西南角为缴费处，人流量大，东南角，靠近楼梯，空间较小，空间流通速度慢，加之人流量大，在综合因素影响下，数据结果显示，此两处空气细菌的计数总数较多;东北角靠近走廊，空气流通速度快，人流量较少，西北角，人数少，偶尔有人，在综合因素影响下，数据结果显示，此两处空气细菌的计数总数较少。由此可见，空气细菌总数还受人流量、空气湿度，空气流通速度以及空间大小等不确定因素的影响。
通过本次研究，检测医院空气细菌的总数反映了培养皿的暴露时间与细菌总数无多大的关系，但很好的反映了细菌计数还受其他因素影响因素。同时，为对减少医源性感染和为医院的清洁消毒工作提供了参考，以便医院采取相应的措施，来改善空气质量，避免医源性感染。
参考文献：
[1]魏世刚，汪亚丽，张姚.检验科医源性感染的危险因素分析与预防控制[J].中华医院感染学杂志，2015，25（2）：472474.
[2]解伟嘉.微生物检验中不同领域培养基质量控制及管理[J].中国医药指南，2019，17（14）：297298.
[3]谢绍霞.微生物检验质量控制方法分析[J].智慧健康，2018，15（8）：1516.
课题来源：山东协和学院大学生实验室开放项目“医院空气细菌总数计数的影响因素研究”，课题编号：2019SYKF14
作者简介：罗金凤（2000），女，四川南充人，山东协和学院2018级医学检验技术专业本科生。
*通讯作者：迟双会（1982），女，黑龙江桦川人，硕士研究生，副教授，山东协和学院教师，研究方向为基础医学、教育学。
关键词：自然沉降法;空气细菌;培养皿暴露时间
医院感染问题是世界范围内瞩目的难题，如果医院性感染大暴发，不仅会导致大量医疗资源的浪费，以及加重患者的经济负担，而且严重的甚至会引起社会恐慌，因此，要加强对医源性感染的认识和理解，特别是提高医护工作人员的思想意识[1]。
目前针对医院感染的控制，关键是在于控制感染源、自身预防和切断传播途径。空气传播途径包括飞沫、飞沫核和尘埃传播方式，是细菌传播的主要途径之一。其传播范围广，传播速度快，途径易实现且发病率高，对患者和儿童、老人等免疫力低下的人群感染性极高。因此检测空气中细菌含量是公共区域空气质量和卫生的参数之一。此外，对于医院病区的清洁消毒的质量，特别是微生物检测的结果缺少深入调研，基础数据匮乏。因此，本实验通过对医院大厅的空气细菌进行采样、检测和初步分析，为医院感染预防提供了基础数据，并为医院的清洁消毒工作提供了参考。
1 实验条件与方法
1.1 实验材料
牛肉膏蛋白胨营养琼脂、蒸馏水。
1.2 实验仪器和设备
培养皿、锥形瓶、烧杯、量筒、高压灭菌锅、超净工作台、恒温培养箱、电子秤、酒精灯、牛皮纸、滤纸、纱布。
1.3 实验设计及过程
1.3.1 消毒灭菌
对实验需要使用的所有器具用蒸馏水洗净并进行灭菌，采用高压蒸汽灭菌法，103.4KPa，121.3℃，30min。
1.3.2 配制培养基
准备培养皿，取40个大小相同，规格为直径9cm的培养皿。利用营养琼脂制作培养基，培养基应颜色不深、无絮状物、无沉淀、无分层以及无气泡为佳[2]，然后进行高压蒸汽灭菌，30分钟，分装后进行无菌检查，24-48小时后取出观察，若无细菌生长则为合格。
1.3.3 放置取样
（1）采菌地点：某医院的大厅（室内面积>30m2）。
（2）采样方法：采取自然沉降法，由于室内面积>30m2，因此可以选取房间五点采取法，设房间四角及中央5点，4角采样点距墙1m处，都距离地面0.5m，采样时间分别为5min，10min，15min，每次采取分为五组。采样结束后扣上皿盖，用记号笔做好标记。
1.3.4 培养
将采集好的培养皿倒置并用纱布包裹，迅速送至培养箱进行细菌培养，培养时间为2448小时。在整个过程中都要做好样品质量及采样过程质量的控制，提高结果准确性及可行性[3]。
1.3.5 数据处理
对每个培养基上的细菌总数进行计数，并统计数据。然后用SPSS19对数据进行t检验，以P<0.05有统计学意义。
2 实验结果
根据采样结果可将实验所得结果进行不同时间段以及采菌布点进行分析。根据统计数据，通过t检验可得结果：平皿暴露5min和10min的数据处理后，P=0.11，P>0.05，表明平皿暴露5分钟和10分钟对细菌数量变化影响不大;平皿暴露5min和15min的数据t检验得出结果P=0.06，P>0.05，表明平皿暴露5分钟和15分钟对细菌数量变化影响不大。由此可见，自然沉降法中，平皿暴露时间并不是越长越好，5分钟、10分钟和15分钟测得的数据并无显著差异。
各采样点不同时间段细菌菌落数的比较表
5min10min15min中112034东南615758东北184745西北102147西南495858
3 结果分析与讨论
通过数据对五个地点进行培养皿暴露時间的比较，得出同一方位的细菌总数含量并不随时间的增长而增加，因此，人们不用担心在医院的时间越长，越易发生医源性感染。通过对不同方位进行比较，发现东南和西南的细菌总数明显多于西北和东北的细菌总数，由于做实验时，西南角为缴费处，人流量大，东南角，靠近楼梯，空间较小，空间流通速度慢，加之人流量大，在综合因素影响下，数据结果显示，此两处空气细菌的计数总数较多;东北角靠近走廊，空气流通速度快，人流量较少，西北角，人数少，偶尔有人，在综合因素影响下，数据结果显示，此两处空气细菌的计数总数较少。由此可见，空气细菌总数还受人流量、空气湿度，空气流通速度以及空间大小等不确定因素的影响。
通过本次研究，检测医院空气细菌的总数反映了培养皿的暴露时间与细菌总数无多大的关系，但很好的反映了细菌计数还受其他因素影响因素。同时，为对减少医源性感染和为医院的清洁消毒工作提供了参考，以便医院采取相应的措施，来改善空气质量，避免医源性感染。
参考文献：
[1]魏世刚，汪亚丽，张姚.检验科医源性感染的危险因素分析与预防控制[J].中华医院感染学杂志，2015，25（2）：472474.
[2]解伟嘉.微生物检验中不同领域培养基质量控制及管理[J].中国医药指南，2019，17（14）：297298.
[3]谢绍霞.微生物检验质量控制方法分析[J].智慧健康，2018，15（8）：1516.
课题来源：山东协和学院大学生实验室开放项目“医院空气细菌总数计数的影响因素研究”，课题编号：2019SYKF14
作者简介：罗金凤（2000），女，四川南充人，山东协和学院2018级医学检验技术专业本科生。
*通讯作者：迟双会（1982），女，黑龙江桦川人，硕士研究生，副教授，山东协和学院教师，研究方向为基础医学、教育学。