【摘 要】
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【目的】克隆小麦种子过氧化物酶基因wp1，并利用原核系统表达纯化。【方法】通过RT-PCR从小麦未成熟种子中扩增wp1基因cDNA，构建His—tag和MBP融合表达载体，并在大肠杆菌中进行
【机 构】
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西北农林科技大学理学院,西北农林科技大学生命科学学院,西北农林科技大学陕西省农业分子重点实验室
【出 处】
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西北农林科技大学学报(自然科学版)
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【目的】克隆小麦种子过氧化物酶基因wp1，并利用原核系统表达纯化。【方法】通过RT-PCR从小麦未成熟种子中扩增wp1基因cDNA，构建His—tag和MBP融合表达载体，并在大肠杆菌中进行表达。使用直链淀粉亲和层析获得MBP-WP1融合蛋白，并以ABTS为底物检测酶活性。【结果】获得的wp1基因eDNA编码一种358个氨基酸残基的蛋白产物，其序列与大麦BP1相似性高达89％；空间结构预测结果表明，小麦WP1属于第三类过氧化物酶，具有该家族成员典型的血红素和钙离子结合位点；His—Tag融合的WP1主要以
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