【摘 要】
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目的:研究附子主要药效成分乌头类生物碱对CYP3A4活性的抑制作用。方法:利用前期实验室构建的pGL4.17-CYP3A4报告基因质粒、pcDNA3.1-hPXR表达质粒与pRL-TK内参质粒共转染Hep
【机 构】
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天津中医药大学,军事医学科学院放射与辐射医学研究所,
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目的:研究附子主要药效成分乌头类生物碱对CYP3A4活性的抑制作用。方法:利用前期实验室构建的pGL4.17-CYP3A4报告基因质粒、pcDNA3.1-hPXR表达质粒与pRL-TK内参质粒共转染HepG2细胞,检测乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、乙酰乌头碱、乌头原碱和苯甲酰乌头碱对PXR的转录激活效应;并利用real time PCR与Western blot技术对乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的不同时间及不同浓度处理组进行mRNA和蛋白的检测。结果:报告基因模型检测结果显示,乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、乙酰乌头碱、乌头原碱和苯甲酰乌头原碱对PXR无转录激活作用,且能下调CYP3A4报告基因荧光值的比活性,其中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱下调作用明显;同时不同浓度乌头碱、新乌头碱、次乌头碱均能下调LS174T细胞中的CYP3A4 mRNA与蛋白表达水平。结论:乌头碱、新乌头碱、次乌头碱对CYP3A4 mRNA与蛋白质水平的表达具有抑制作用。在临床用药过程中,可能会导致药物-药物相互作用。
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