【摘 要】
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目的克隆、表达、纯化布鲁氏菌Omp16重组蛋白,并制备多克隆抗体,评估其作为布鲁氏菌蛋白质疫苗的可行性。方法PCR法扩增全长及截短的布鲁氏菌Omp16基因,并将其克隆入pET28a(+
【机 构】
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遵义医学院检验医学院,遵义医学院附属医院医学检验科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81460317)
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目的克隆、表达、纯化布鲁氏菌Omp16重组蛋白,并制备多克隆抗体,评估其作为布鲁氏菌蛋白质疫苗的可行性。方法PCR法扩增全长及截短的布鲁氏菌Omp16基因,并将其克隆入pET28a(+)载体中;经菌液PCR和测序鉴定后,再转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经异丙基硫代?β?D?半乳糖苷(IPTG)诱导表达及镍柱纯化后,获取高纯度的Omp16目的蛋白,然后将其免疫BALB/c小鼠以制备多克隆抗体,Westernblotting检测抗体的特异性免疫反应。结果成功构建了全长及截短表达的Omp16原核表达质粒,经
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