论文部分内容阅读
目的 采用胶原酶预消化组织块贴壁法培养人退变椎间盘髓核细胞,与单纯Ⅱ型胶原酶消化法比较培养效果.方法 收集腰椎间盘退变患者的髓核组织分为A、B两组进行培养.A组:体积分数0.025％Ⅱ型胶原酶预消化30 min后组织块接种;B组:体积分数0.025％Ⅱ型胶原酶消化5h后过滤、离心、接种培养.比较两种方法培养成功率和原代细胞融合时间.HE、甲苯胺蓝、免疫细胞荧光染色法观察细胞形态及Sox-9、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达.结果 A、B两组培养成功率差异无统计学意义(P＞0.05),融合时间A组显著短于B组(P＜0.01).A组培养的髓核细胞可被甲苯胺蓝染成天蓝色,免疫细胞荧光检测Sox-9、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖呈阳性表达.结论 与单纯Ⅱ形胶原酶消化法比较,Ⅱ型胶原酶预消化后贴壁培养法培养人退变椎间盘髓核细胞成功率高,短时间内可获大量细胞,且强表达Sox-9、Ⅱ型胶原和蛋白聚糖。