人白细胞介素7基因克隆及其真核表达载体的构建

来源 :浙江大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：jingjing2011

【摘要】

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目的:构建人白细胞介素7(hIL-7)的真核表达载体.方法:从人脾脏组织的总RNA中,用RT-PCR方法扩增出编码成熟hIL-7的cDNA,将其克隆于pMD18-T质粒中,并进行序列测定.再将hIL-7cDN

【作者】

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程蓓叶大风谢幸陈怀增吕卫国

【机构】

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浙江大学医学院附属妇产科医院

【出处】

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浙江大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2002年3期

【关键词】

：

人白细胞介素7 CDNA 分子克隆真核表达载体 Human interleukin7/biosyn cDNA Molecular cloning Euk

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目的:构建人白细胞介素7(hIL-7)的真核表达载体.方法:从人脾脏组织的总RNA中,用RT-PCR方法扩增出编码成熟hIL-7的cDNA,将其克隆于pMD18-T质粒中,并进行序列测定.再将hIL-7cDNA以正义及反义插入真核、原核双重表达载体pBK-CMV质粒,转化至大肠杆菌DH5α.最后将表达的lacz-hIL-7重组蛋白行SDS-PAGE电泳,并作考马斯亮蓝染色分析,western blot鉴定.结果:hIL-7序列测定结果与预期一致.pBK-CMV-hIL-7(正义插入)的克隆表达重组蛋白,w

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