【摘 要】
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目的 通过对PCR监测中2种常用核酸提取方法的比较,为不同的需要选择病毒核酸检测实验中的最佳提取方法.方法 利用国家流感网络实验室分离到的10株甲型H3N2流感病毒毒株,分别采用滤膜法和磁珠法进行核酸提取,对收集到的核酸分别进行扩增比对分析;用一株甲型H3N2流感病毒毒株以10倍为单位进行10～90倍稀释,获得10组不同的稀释标本,滤膜法和磁珠法分别进行同步提取,比对扩增结果.结果 磁珠法在核酸提取中的效率明显高于滤膜法,结果差异均值为1.29个Ct值,有统计学意义(P＜0.05).滤膜法的核酸提取过程中
【机 构】
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日照市疾病预防控制中心,山东日照276826
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目的 通过对PCR监测中2种常用核酸提取方法的比较,为不同的需要选择病毒核酸检测实验中的最佳提取方法.方法 利用国家流感网络实验室分离到的10株甲型H3N2流感病毒毒株,分别采用滤膜法和磁珠法进行核酸提取,对收集到的核酸分别进行扩增比对分析;用一株甲型H3N2流感病毒毒株以10倍为单位进行10～90倍稀释,获得10组不同的稀释标本,滤膜法和磁珠法分别进行同步提取,比对扩增结果.结果 磁珠法在核酸提取中的效率明显高于滤膜法,结果差异均值为1.29个Ct值,有统计学意义(P＜0.05).滤膜法的核酸提取过程中,经反复冲洗后仍可获得较理想的Ct值,前3次的冲洗Ct值差值均值分别为1.39和1.49,差异有统计学意义(P＜0.05);第三次和第四次的冲洗,Ct值差值均值为0.17,无统计学意义(P＞0.05).结论 磁珠法的提取效率明显高于传统滤膜法,在敏感性较高的疫情处置中及处于灰区或者阴性的标本复核中,可利用磁珠法提高结果的准确性;滤膜法可在标本量较少的情况下经多批次的冲洗后,能为进一步的科研分析与多项目检测提供较多的核酸提取物.
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