论文部分内容阅读
目的构建携带脑组织特异性miRNA靶序列的重组日本脑炎病毒株。方法利用反向遗传学技术将脑组织特异性的miR-124和miR-125靶序列引入日本脑炎病毒cDNA全长感染性克隆，将重组质粒用Xho I线性化后采用SP6转录试剂盒进行体外转录，以获得的RNA转染BHK-21细胞，37℃、5％CO2孵箱培养3d后取上清盲传1代观察细胞病变，并通过RT—PCR、细胞蚀斑形成实验和病毒生长曲线等方法对恢复病毒的生物学特性进行鉴定。结果成功在BHK-21细胞中拯救获得了携带miRNA靶序列的重组病毒，与野生型病毒株具