【摘 要】
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【目的】在原核表达系统中高效表达真核生物中与抗寒相关的转录因子CBF基因,验证序列的正确性,摸索高效表达的条件,为后续转录因子的功能验证奠定基础。【方法】以具有耐低温
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划863项目(2012AA101108)~~
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【目的】在原核表达系统中高效表达真核生物中与抗寒相关的转录因子CBF基因,验证序列的正确性,摸索高效表达的条件,为后续转录因子的功能验证奠定基础。【方法】以具有耐低温胁迫的两种早春短命植物绵果荠和卷果涩荠为材料,扩增两端有NcoⅠ和Hind III酶切位点的Ll CBF和Ms CBF基因的CDS全长,构建原核表达载体p ET32a-Ll CBF和p ET32a-Ms CBF,并将其转入Rosetta(DE3)菌株,进行了15、25、30和37℃下不同IPTG浓度的诱导表达;选择表达量最大时的温度及IPTG
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